Diferença chave - citometria de fluxo vs FACS
No contexto da teoria celular, as células são a unidade básica estrutural e funcional de todos os organismos vivos. A classificação celular é uma metodologia utilizada para separar diferentes células de acordo com as características fisiológicas e morfológicas. Eles podem ser de características intracelulares ou extracelulares. A interação de DNA, RNA e proteínas são consideradas propriedades interativas intracelulares, enquanto a forma, o tamanho e as diferentes proteínas de superfície são consideradas propriedades extracelulares. Na ciência moderna, as metodologias de classificação de células têm levado a auxiliar as diferentes investigações em estudos biológicos e também no estabelecimento de novos princípios por meio da pesquisa em medicina. A classificação de células é conduzida em várias metodologias que incluem tanto primitivas com menos equipamentos quanto metodologias tecnológicas avançadas com o uso de maquinários sofisticados. Citometria de fluxo, classificação de células ativadas por fluorescência (FACS), seleção de células magnéticas e classificação de células únicas são as principais metodologias utilizadas. A citometria de fluxo e FACS são desenvolvidos para diferenciar as células de acordo com suas propriedades ópticas. FACS é um tipo especializado de citometria de fluxo. A citometria de fluxo é uma metodologia utilizada durante a análise de uma população heterogênea de células de acordo com diferentes moléculas da superfície celular, tamanho e volume que permite a investigação de células individuais. FACS é um processo pelo qual uma mistura de amostra de células é classificada de acordo com sua dispersão de luz e características de fluorescência em dois ou mais recipientes. Esta é a principal diferença entre a citometria de fluxo e FACS.
CONTEÚDO
1. Visão geral e diferença principal
2. O que é citometria de fluxo
3. O que é FACS
4. Semelhanças entre citometria de fluxo e FACS
5. Comparação lado a lado - Citometria de fluxo vs FACS em forma tabular
6. Resumo
O que é citometria de fluxo?
A citometria de fluxo é um método utilizado para examinar e determinar a expressão de moléculas intracelulares e da superfície celular e para definir e caracterizar tipos celulares distintos. Também é usado na determinação do volume e tamanho das células e para avaliar a pureza das subpopulações que são isoladas. Isso permite a avaliação de vários parâmetros de células individuais aproximadamente ao mesmo tempo. A citometria de fluxo é usada para medir a intensidade da fluorescência que é produzida devido a anticorpos marcados com fluorescência que ajudam a identificar proteínas ou ligantes que se ligam a células associadas.
Figura 01: Citometria de fluxo
Geralmente, a citometria de fluxo inclui três subsistemas principalmente. Eles são a fluídica, a eletrônica e a óptica. Na citometria de fluxo, cinco componentes principais estão disponíveis, os quais são usados na seleção de células. Eles são, uma célula de fluxo (um fluxo de líquido que é usado para transportá-los e alinhar as células para o processo de detecção óptica), um sistema de medição (pode ser de diferentes sistemas, incluindo lâmpadas de mercúrio e xenônio, refrigeração de água de alta potência ou lasers refrigerados a ar de baixa potência ou lasers de diodo), um ADC; Sistema conversor analógico-digital, sistema de amplificação e um computador para análise. A aquisição é o processo pelo qual os dados são coletados das amostras por meio do citômetro de fluxo. Este processo é mediado por um computador conectado ao citômetro de fluxo. O software presente no computador analisa as informações fornecidas ao computador pelo citômetro de fluxo. O software também tem a capacidade de ajustar os parâmetros do experimento controlando o citômetro de fluxo.
O que é FACS?
No contexto da citometria de fluxo, a classificação de células ativadas por fluorescência (FACS) é um método utilizado na diferenciação e classificação de uma amostra de uma mistura de células biológicas. As células são separadas de dois ou mais recipientes. O método de classificação é baseado nas características físicas da célula, que inclui a dispersão de luz e as características de fluorescência da célula. Esta é uma técnica científica importante, que pode ser utilizada para obter resultados quantitativos e qualitativos confiáveis dos sinais de fluorescência emitidos por cada célula. Durante o FACS, inicialmente, a mistura pré-obtida de células; uma suspensão é direcionada para o centro de um estreito fluxo de líquido que flui rapidamente. O fluxo de líquido é projetado de forma a separar as células da suspensão com base no diâmetro de cada célula. Um mecanismo de vibração é aplicado ao fluxo de suspensão que resulta na formação de gotículas individuais.
Figura 02: FACS
O sistema é calibrado para criar uma única gota com uma célula. Pouco antes da formação das gotículas, a suspensão de fluxo se move ao longo de um aparelho de medição de fluorescência que detecta a fluorescência característica de cada célula. No ponto de formação das gotículas, um anel de carga elétrica é colocado, o qual uma carga é induzida ao anel antes da medição da intensidade de fluorescência. Uma vez que as gotículas são formadas a partir do fluxo de suspensão, uma carga é capturada dentro das gotículas que, então, entra em um sistema de deflexão eletrostática. De acordo com a cobrança, o sistema desvia as gotas para diferentes recipientes. O método de aplicação da carga varia de acordo com os diferentes sistemas utilizados no FACS. O equipamento usado no FACS é conhecido como classificador de células ativadas por fluorescência.
Qual é a semelhança entre citometria de fluxo e FACS?
A citometria de fluxo e FACS são desenvolvidos para diferenciar as células de acordo com suas propriedades ópticas
Qual é a diferença entre citometria de fluxo e FACS?
Artigo Diff meio antes da tabela
Citometria de fluxo vs FACS |
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| A citometria de fluxo é uma metodologia utilizada durante a análise de uma população heterogênea de células de acordo com diferentes moléculas da superfície celular, tamanho e volume que permite a investigação de células individuais. | FACS é um processo pelo qual uma mistura de amostra de células é classificada de acordo com sua dispersão de luz e características de fluorescência em dois ou mais recipientes. |
Resumo - Citometria de fluxo vs FACS
A célula é a unidade básica estrutural e funcional de todos os organismos vivos. A classificação celular é o processo pelo qual as células são isoladas e diferenciadas em diferentes categorias com base em suas propriedades intracelulares e extracelulares. A citometria de fluxo e FACS são duas metodologias importantes na classificação de células. Ambos os processos são desenvolvidos para diferenciar as células de acordo com suas propriedades ópticas. A citometria de fluxo é uma metodologia utilizada durante a análise de uma população heterogênea de células de acordo com diferentes moléculas da superfície celular, tamanho e volume que permite a investigação de células individuais. FACS é um processo pelo qual uma mistura de amostra de células é classificada de acordo com sua dispersão de luz e características de fluorescência em dois ou mais recipientes. Esta é a diferença entre citometria de fluxo e FACS.
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