Diferença chave - coloração de Gram vs cultura
A coloração de Gram é uma técnica de coloração realizada para diferenciar as bactérias em dois grupos de acordo com a espessura da camada de peptidoglicano em sua parede celular. A cultura é um método de cultivo e manutenção de microrganismos em condições de laboratório para diferentes análises. A principal diferença entre a coloração de gramas e a cultura é sua função; cepa de grama uma técnica de coloração de bactérias em que a cultura é um método de cultivo e manutenção de microorganismos.
CONTEÚDO
1. Visão geral e diferença principal
2. O que é coloração de Gram
3. O que é cultura
4. Comparação lado a lado - coloração de Gram vs cultura
5. Resumo
O que é Gram Stain?
A coloração de Gram é uma importante técnica de coloração diferencial usada para identificação bacteriana em Microbiologia. Esta técnica foi introduzida pelo bacteriologista dinamarquês Hans Christian Gram em 1884. A coloração de Gram categoriza as bactérias em dois grupos principais: gram positivas e gram negativas; estes são muito importantes na classificação e identificação bacteriana. A coloração de Gram é realizada como uma etapa inicial para a caracterização bacteriana.
As bactérias são agrupadas com base nas diferenças em sua parede celular. As bactérias Gram positivas contêm uma espessa camada de peptidoglicano em sua parede celular, enquanto as bactérias Gram negativas contêm uma fina camada de peptidoglicano em sua parede celular, conforme mostrado na figura 01. O resultado da coloração de Gram será baseado na diferença de espessura na camada de peptidoglicano do parede celular.
Figura 1: bactérias Gram positivas e bactérias Gram negativas
A coloração de gramas é realizada usando quatro reagentes diferentes, a saber; mancha primária, mordente, agente descolorante e contra-manchas. Violeta de cristal e safranina servem como manchas primárias e contrárias, respectivamente, enquanto os gramas de iodo e álcool 95% servem como mordente e descolorante, respectivamente.
Etapas básicas da coloração de grama
- Um esfregaço bacteriano é preparado em uma lâmina de vidro limpa, fixada por calor e resfriada.
- O esfregaço é inundado com violeta cristal por 1 - 2 minutos.
- O esfregaço é enxaguado com água corrente lentamente para remover o excesso de manchas.
- Gramas de iodo é aplicado no esfregaço por 1 minuto.
- O esfregaço é enxaguado com água da torneira lenta
- O esfregaço é lavado com álcool 95% durante 2 a 5 segundos e enxaguado com água da torneira a correr lentamente.
- O esfregaço é contrastado com safranina por 1 minuto
- O esfregaço é enxaguado com água corrente lenta, seco e observado ao microscópio.
No final da coloração de Gram, as bactérias Gram negativas serão observadas na cor rosa, enquanto as bactérias Gram positivas serão observadas na cor roxa, conforme mostrado na Figura 02. O resultado da coloração de gramas é decidido pela espessura da camada de peptidoglicano em sua parede celular. Durante a etapa de descoloração, a mancha primária e o mordente são facilmente removidos das bactérias gram-negativas e tornam-se incolores por apresentarem uma fina camada de peptidoglicano. A mancha primária é retida nas bactérias gramas positivas, uma vez que elas possuem uma espessa camada de peptidoglicano. A contracoloração não será eficaz para bactérias gramas positivas devido à retenção da mancha primária. Portanto, gramas de bactérias positivas serão visíveis na cor da mancha primária, ou seja, na cor roxa. A contra-coloração manchará as bactérias Gram negativas e será visível na cor escolhida, que é a cor da safranina. Portanto, é fácil categorizar bactérias em dois grupos pela coloração de Gram e é valioso na diferenciação e identificação bacteriana.
Figura 2: cepa de Gram
O que é cultura?
A cultura microbiana é um método de cultivo e manutenção de microrganismos em condições de laboratório para diferentes fins. As culturas são cultivadas em meios sólidos, semissólidos e líquidos com base no tipo e na finalidade da cultura do microrganismo. As culturas são fornecidas com os nutrientes necessários e as condições de crescimento exigidas pelos microrganismos. Existem diferentes componentes de um meio de cultura, como fonte de energia, fonte de carbono, fonte de nitrogênio, minerais, micronutrientes, água, agente de solidificação, etc. A temperatura ideal, oxigênio e pH devem ser ajustados de acordo com o tipo de microrganismo cultivado.
Existem diferentes tipos de culturas microbianas; por exemplo, cultura em lote, cultura contínua, cultura stab, cultura em placa de ágar, cultura em caldo, etc. De acordo com a composição do meio de crescimento, existem diferentes tipos de meios de cultura conhecidos como meios sintéticos, meios semissintéticos e meios naturais. As culturas microbianas são preparadas em condições estéreis dentro de uma câmara especial chamada fluxo de ar laminar. O meio de cultivo e a vidraria são esterilizados antes da inoculação do microrganismo desejado. Sob condições estéreis adequadas, o microrganismo alvo é transferido para o meio nutriente esterilizado e incubado em temperatura ideal. Dentro do meio, o microorganismo crescerá e se multiplicará usando os nutrientes fornecidos.
Figura 3: Uma cultura bacteriana na placa
Qual é a diferença entre Gram Stain e Culture?
Artigo Diff meio antes da tabela
Coloração de Gram vs Cultura |
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| A cepa de Gramas é uma técnica de coloração diferencial usada para diferenciação e identificação bacteriana. | A cultura microbiana é um método de cultivo de microorganismos em laboratório. |
| Componentes | |
| Isso usa reagentes diferentes, incluindo duas manchas. | Isso usa diferentes meios de cultura, como meios sólidos, semi-sólidos e líquidos compostos de nutrientes e outras condições necessárias. |
| Funções básicas | |
| Isso permite o agrupamento de bactérias em dois grupos: gramas negativos e gramas positivos. | Isso permite a multiplicação de microrganismos para diferentes fins. |
| Base | |
| O resultado da coloração de Gram é baseado nas diferenças na camada de peptidoglicano da parede celular. | Os microrganismos irão crescer e se multiplicar dentro dos meios de cultura. |
| Resultado | |
| As bactérias gramas negativas são visíveis na cor rosa e as bactérias gramas positivas são visíveis na cor roxa. | Nas placas, podem ser vistas colônias de microrganismos. Em meio líquido, os microrganismos estão na forma suspensa. |
Resumo - Coloração de Gram vs. Cultura
As culturas microbianas são preparadas e mantidas em condições de laboratório para diferentes fins, como armazenamento, teste, purificação química, etc. A coloração de gramas é um procedimento de coloração que diferencia as bactérias em dois grupos principais chamados bactérias gramas negativas e gramas positivas. Portanto, a diferença entre a coloração de gramas e a cultura é que a coloração de gramas é uma técnica de coloração de bactérias, enquanto a cultura é um método de cultivo e manutenção de microrganismos em laboratórios.
