Diferença principal - coloração de Gram vs ácido rápido
As bactérias são microrganismos muito pequenos. Eles são transparentes e sua detecção é difícil em condições de vida e sem manchas. Assim, vários métodos de coloração são desenvolvidos para facilitar a detecção bacteriana. Existem três tipos principais de técnicas de coloração: coloração simples, coloração diferencial e coloração estrutural. A coloração diferencial é uma técnica que usa mais de uma coloração para diferenciar bactérias. A coloração de Gram e a coloração ácido-resistente são mais popularmente conhecidas como colorações diferenciais. A coloração de Gram é uma técnica de coloração diferencial, que separa as bactérias em dois grupos conhecidos como bactérias Gram-positivas e bactérias Gram-negativas. A coloração ácido-resistente é uma coloração diferencial usada para identificar organismos álcool-resistentes, como Mycobacterium, de organismos não-ácido resistentes. Esta é a principal diferença entre a coloração de Gram e a coloração Acid Fast.
CONTEÚDO
1. Visão geral e diferença chave
2. O que é coloração de Gram
3. O que é ácido-resistente
4. Semelhanças entre coloração de Gram e ácido-resistente
5. Comparação lado a lado - coloração de Gram vs ácido-resistente na forma tabular
6. Resumo
O que é Gram Stain?
A coloração de Gram é uma importante técnica de coloração diferencial usada para identificação bacteriana em microbiologia. Esta técnica foi introduzida pelo bacteriologista dinamarquês Hans Christian Gram em 1884. A coloração de Gram categoriza as bactérias em dois grupos principais denominados gram positivos e gram negativos, que são muito importantes na classificação e identificação bacteriana. Microbiologistas realizam a coloração de Gram como uma etapa inicial na caracterização bacteriana durante seus estudos.
As bactérias são agrupadas com base nas diferenças em sua parede celular. As bactérias Gram positivas são compostas por uma espessa camada de peptidoglicano em sua parede celular, enquanto as bactérias Gram negativas são compostas por uma fina camada de peptidoglicano em sua parede celular. O resultado da coloração de Gram será baseado na diferença na espessura da camada de peptidoglicano da parede celular.
A coloração de gramas é realizada usando quatro reagentes diferentes, a saber; mancha primária, mordente, agente descolorante e contra-manchas. O violeta de cristal e a safranina são usados como corantes primários e contrários, respectivamente, enquanto gramas de iodo e álcool a 95% são usados como mordente e descolorante, respectivamente. Os passos básicos da coloração de gramas são os seguintes;
- Um esfregaço bacteriano é preparado em uma lâmina de vidro limpa, fixada por calor e resfriada.
- O esfregaço é inundado com violeta cristal por 1 - 2 minutos.
- O esfregaço é enxaguado com água corrente lentamente para remover o excesso de manchas.
- Gramas de iodo é aplicado no esfregaço por 1 minuto.
- O esfregaço é enxaguado com água da torneira lenta
- O esfregaço é lavado com álcool 95% durante 2 a 5 segundos e enxaguado com água da torneira a correr lentamente.
- O esfregaço é contrastado com safranina por 1 minuto
- O esfregaço é enxaguado com água corrente lenta, seco e observado ao microscópio.
No final da coloração de Gram, as bactérias Gram negativas serão observadas na cor rosa enquanto as bactérias Gram positivas serão observadas na cor roxa.
Figura 01: Bactérias Gram negativas e Gram positivas
O resultado da coloração de gramas é decidido pela espessura da camada de peptidoglicano em sua parede celular. Durante a etapa de descoloração, a mancha primária e o mordente são facilmente removidos das bactérias gram-negativas e tornam-se incolores por apresentarem uma fina camada de peptidoglicano. A mancha primária é retida nas bactérias gram positivas, uma vez que elas possuem uma espessa camada de peptidoglicano. A contracoloração não será eficaz para bactérias gram-positivas devido à retenção da mancha primária. Assim, bactérias positivas em gramas serão visíveis na cor da mancha primária, ou seja, na cor roxa. A contra-coloração irá manchar as bactérias Gram negativas e elas serão visíveis na cor escolhida, que é a cor da safranina. Portanto, é fácil categorizar as bactérias em dois grupos por coloração de Gram e é valioso na diferenciação e identificação bacteriana.
O que é ácido rápido?
A resistência ao ácido é uma propriedade física de certas bactérias, especificamente sua resistência à descoloração por ácidos durante os procedimentos de coloração. Uma vez corados, esses organismos resistem aos procedimentos de descoloração à base de ácido diluído e / ou etanol, comuns em muitos protocolos de coloração. Assim, o nome 'ácido rápido' é dado a esses organismos. Esta propriedade é demonstrada devido ao alto nível de material ceroso (ácidos micólicos) em suas paredes celulares. Este teste é fundamental para a identificação do Mycobacterium tuberculosis.
Figura 2: Micobactérias ácido-resistentes
Este corante ácido resistente foi desenvolvido por Paul Ehrlich em 1882. A técnica de ácido resistente de Ehrlich foi modificada por Ziehl-Neelsen e agora é usada com mais frequência. O procedimento de coloração rápida com ácido envolve três reagentes diferentes. Carbol fuschin é usado como corante primário. Álcool ácido é usado como agente descolorante. Azul de metileno é usado como contra-coloração. O procedimento de coloração é realizado da seguinte forma.
- A coloração primária (carbol fucsina) é aplicada à amostra fixada na lâmina (todas as células serão coradas em vermelho).
- A lâmina é aquecida por vaporização por 5 minutos, o que leva as manchas para as células de maneira adequada.
- Em seguida, a solução descolorante é adicionada (isso remove o corante vermelho de todas as células, exceto as bactérias ácido resistentes).
- Azul de metileno é adicionado como uma contra-coloração (ele colore todas as células bacterianas descoloridas).
- As bactérias ácido-resistentes permanecem vermelhas, enquanto as bactérias não-ácido-resistentes se coram de azul.
Quais são as semelhanças entre a coloração de Gram e o ácido rápido?
- A coloração de Gram e o ácido rápido são duas técnicas de coloração diferenciais.
- Ambas as técnicas categorizam as bactérias em dois grupos.
- Ambas as técnicas usam duas manchas e uma descoloração.
Qual é a diferença entre a coloração de Gram e ácido rápido?
Artigo Diff meio antes da tabela
Coloração de Gram vs ácido rápido |
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| A coloração de Gram é uma técnica de coloração diferencial, que separa as bactérias em dois grupos de bactérias Gram-positivas e bactérias Gram-negativas. | A coloração ácido-resistente é uma coloração diferencial usada para identificar organismos ácido-resistentes de organismos não-ácido-resistentes. |
| Mancha Primária | |
| Violeta de cristal é o corante primário comumente usado na coloração de Gram. | Carbol fuchsin é o corante primário usado em ácido resistente. |
| Agente descolorante | |
| Álcool 95% é usado como agente descolorante na coloração de Gram. | O álcool ácido é usado como agente descolorante em ácido resistente. |
| Contra Coloração | |
| A coloração de Gram usa safranina como contra-coloração. | A coloração ácido-resistente usa azul de metileno como contra-coloração. |
| Observação | |
| Bactérias gram negativas são observadas na cor de pico e bactérias positivas em gramas são observadas na cor roxa. | As bactérias ácido-resistentes são observadas na cor vermelha e as bactérias não ácido-resistentes são observadas na cor azul. |
Resumo - Coloração de Gram vs ácido rápido
A visualização de microrganismos em estado de vida é difícil. Portanto, colorações biológicas e procedimentos de coloração são usados extensivamente para estudar suas propriedades. A coloração diferencial é um tipo de técnica de coloração usada para diferenciar bactérias. A coloração de Gram e a coloração ácido-resistente são duas técnicas de coloração diferenciais. A coloração de Gram diferencia bactérias Gram negativas e bactérias Gram positivas com base na espessura de suas paredes celulares. A coloração ácido-resistente diferencia as bactérias ácido-resistentes das não-ácido-resistentes com base no conteúdo de ácido micólico na parede celular. Esta é a diferença entre ácido resistente e coloração de Gram.
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