Diferença chave - hibridização in situ vs imunohistoquímica
O diagnóstico de câncer e doenças infecciosas é uma tendência popular em que novas técnicas baseadas em proteômica e genômica são utilizadas com o objetivo de identificar tumores ou células infecciosas, sua proliferação e os locais de desenvolvimento celular e analisar a base genética da maioria das doenças transmissíveis e não transmissíveis. Isso resultará no processamento e design de medicamentos precisos e no desenvolvimento de terapias personalizadas para doenças. A hibridização in situ (ISH) e a imunohistoquímica (IHC) são duas técnicas amplamente utilizadas na biologia do câncer e a principal diferença entre a hibridização in situ e a imunoquímica está nas moléculas que são usadas no procedimento de análise. Na ISH, as sondas de ácido nucléico são usadas na análise, enquanto que, na IHC, os anticorpos monoclonais e policlonais são usados para as determinações diagnósticas.
CONTEÚDO
1. Visão geral e diferença principal
2. O que é hibridização in situ
3. O que é imunohistoquímica
4. Semelhanças entre hibridização in situ e imunohistoquímica
5. Comparação lado a lado - hibridização in situ vs imunohistoquímica na forma tabular
6. Resumo
O que é hibridização in situ (ISH)?
A hibridização in situ é uma técnica de hibridização de ácido nucleico que é realizada diretamente em uma porção ou seção de tecido, em todo o tecido ou em células. A técnica depende da teoria do emparelhamento de bases complementares de Watson Crick, resultando em híbridos DNA-DNA ou híbridos DNA-RNA que podem detectar genes mutantes ou identificar o gene de interesse necessário. Sequências de DNA de fita simples, sequências de DNA de fita dupla, sequências de RNA de fita simples ou sequências de oligonucleotídeos sintéticos são usadas como sondas durante a técnica de hibridização, e essas sondas são marcadas com um fósforo radioativo em sua extremidade 5 'para procedimentos de identificação por autorradiografia ou marcadas usando corantes fluorescentes. Existem diferentes tipos de técnicas ISH disponíveis com base no tipo de sonda usada e o tipo de técnica de visualização seguida.
Figura 01: Hibridização fluorescente in situ
Muitas são as aplicações do ISH, principalmente no diagnóstico molecular de doenças infecciosas, a fim de identificar a presença de patógenos e confirmar o patógeno via diagnóstico molecular. Ele também é usado nas áreas de biologia do desenvolvimento, cariótipo e análise filogenética e mapeamento físico de cromossomos.
O que é imunohistoquímica (IHC)?
Na técnica de IHC, a principal molécula analisada é o antígeno. Durante a IHC, os anticorpos monoclonais e policlonais são utilizados para determinar a presença de antígenos após a infecção ou o estado de proliferação de células malignas. A técnica é baseada na ligação antígeno-anticorpo, e marcadores de enzima são usados para esta técnica; uma dessas aplicações é o ELISA (Enzyme linked immunosorbent assay). Os marcadores também podem ser anticorpos marcados com fluorescência ou anticorpos marcados com rádio.
Figura 02: Imunohistoquímica
IHC é amplamente utilizado para detecção de células cancerosas. Os procedimentos de diagnóstico visam os antígenos presentes nas células tumorais para identificar e caracterizar o tumor. O mesmo procedimento é incorporado para diagnosticar agentes infecciosos. Os anticorpos monoclonais e policlonais também são usados para analisar diferentes produtos gênicos, permitindo a reação de ligação anticorpo-antígeno entre a proteína desejada e o anticorpo sintético administrado.
Quais são as semelhanças entre a hibridização in situ e a imunohistoquímica?
- ISH e IHC são reações altamente específicas.
- Ambas as técnicas são altamente precisas.
- Ambas as técnicas podem ser utilizadas no diagnóstico de câncer e doenças infecciosas.
- Essas técnicas são realizadas em ambientes in vitro estéreis.
- Ambas são técnicas rápidas que fornecem resultados reproduzíveis.
- ISH e IHC usam métodos de detecção, como marcação de rádio e técnicas de fluorescência.
Qual é a diferença entre a hibridização in situ e a imunohistoquímica?
Artigo Diff meio antes da tabela
Hibridização in situ vs imunohistoquímica |
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| ISH é uma técnica de hibridização de ácido nucleico que é realizada diretamente em uma porção ou seção do tecido ou em todo o tecido. | IHC é uma técnica em que anticorpos monoclonais e policlonais são utilizados para determinar a presença de antígenos, que são marcadores protéicos especiais colocados nas superfícies celulares. |
| Tipo de bio moléculas analisadas | |
| ISH analisa ácidos nucléicos. | IHC analisa proteínas-antígenos. |
| Base da reação bioquímica | |
| O emparelhamento de bases complementares entre DNA-DNA ou DNA-RNA ocorre nesta técnica. | As interações antígeno-anticorpo estão envolvidas na imunohistoquímica. |
| Métodos de detecção ligados a enzimas | |
| Os métodos de detecção ligados a enzimas não podem ser usados no ISH. | Os métodos de detecção ligados a enzimas podem ser usados em IHC. |
Resumo - Hibridização in situ vs imunohistoquímica
O diagnóstico molecular é um método rápido e confirmatório que pode ser utilizado para identificar uma doença não transmissível, como câncer ou doença transmissível, como HIV ou tuberculose, com base nos marcadores moleculares presentes nas células que levam à manifestação da doença. Os marcadores moleculares podem estar presentes na forma de proteínas expressas ou no nível genético com base nas quais diferentes novas técnicas são introduzidas para aumentar a eficiência e são menos trabalhosas, embora haja um alto custo envolvido com essas técnicas. Assim, ISH depende da formação de híbridos DNA-DNA ou DNA-RNA, e IHC depende das reações específicas entre o anticorpo e o antígeno. Esta é a diferença entre a hibridização in situ.
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