Diferença Chave - Vetores YAC vs BAC
Os vetores são usados na clonagem molecular. Um vetor pode ser definido como uma molécula de DNA que se comporta como um veículo para transportar material genético estranho para outra célula. Um vetor contendo DNA estranho é conhecido como DNA recombinante e deve ter a capacidade de se replicar e expressá-lo dentro do organismo hospedeiro. Cromossomo artificial de levedura (YAC) e cromossomo artificial bacteriano (BAC) são dois tipos de vetores envolvidos na clonagem. A principal diferença entre YAC e BAC é que YAC é um sistema de vetor construído artificialmente usando uma região específica do cromossomo de levedura para inserir grandes segmentos de materiais genéticos em células de levedura, enquanto o BAC é um sistema de vetor artificialmente construído usando uma região específica do cromossomo de E. coli para inserir grandes segmentos de DNA em células de E. coli.
CONTEÚDO
1. Visão geral e diferença-chave
2. O que são vetores YAC
3. O que são vetores BAC
4. Comparação lado a lado - vetores YAC vs BAC
5. Resumo
O que são vetores YAC?
YAC (cromossomo artificial de levedura) é um cromossomo construído artificialmente que tem a capacidade de transportar um grande segmento de DNA estranho e se replicar dentro das células de levedura. Ele tem um centrômero, telômeros, bem como sequências de replicação autônoma que são essenciais para a replicação e estabilidade. O YAC também deve conter um marcador ou marcadores seletivos e locais de restrição para torná-lo um vetor de clonagem eficaz. Uma grande sequência variando de 1000 kb a 2000 kb pode ser inserida no YAC e transferida para a levedura. A eficiência de transformação do YAC é muito baixa.
Figura 01: Vetor YAC
O que são vetores BAC?
O cromossomo bacteriano artificial (BAC) é um cromossomo construído artificialmente para clonagem molecular. Possui regiões específicas do plasmídeo F de E. coli e é circular e superenrolado. O BAC foi desenvolvido para clonar fragmentos de DNA para bactérias, especialmente para E. coli. Ele pode conter fragmentos de DNA com tamanhos de até 300 kb. Em comparação com YAC, as inserções de clonagem BAC são menores em tamanhos. Os BACs foram desenvolvidos em 1992 e ainda são populares devido à sua estabilidade e facilidade de construção. BACs também são úteis no desenvolvimento de vacinas.
Figura 02: Vetor BAC na clonagem molecular
Qual é a diferença entre os vetores YAC e BAC?
Artigo Diff meio antes da tabela
Vetores YAC vs BAC |
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| YAC é um cromossomo geneticamente modificado com o uso de DNA de levedura para fins de clonagem. | BAC é uma molécula de DNA geneticamente modificada que usa DNA de E. coli para fins de clonagem. |
| Gênero | |
| YACs foram projetados para clonar grandes fragmentos de DNA genômico em levedura. | Os BACs foram desenvolvidos para clonar grandes fragmentos genômicos em Escherichia coli. |
| Comprimento da inserção | |
| Os YACs podem conter inserções genômicas do tamanho de uma megabase (1000 kb - 2000 kb). | BACs podem carregar inserções de 200–300 kb ou menos. |
| Construção | |
| O DNA YAC é difícil de purificar intacto e requer alta concentração para gerar o sistema de vetor YAC. | O BAC é fácil de purificar intacto e pode ser facilmente construído. |
| Quimerismo | |
| Os YACs costumam ser quiméricos. | BACs raramente são quiméricos. |
| Estabilidade | |
| YAC está instável. | BAC é estável. |
| Modificações | |
| A recombinação do fermento é muito viável e sempre permanece ativa. Portanto, pode gerar exclusões e outros rearranjos em um YAC. | A recombinação de E. coli é evitada e ativada quando necessário. Conseqüentemente, ele reduz os rearranjos indesejados nos BACs. |
| Manutenção | |
| Manipular YACs recombinantes geralmente requer que o YAC seja transferido para E. coli para manipulação subsequente. Portanto, é um processo trabalhoso. | A modificação do BAC ocorre diretamente em E. coli. Portanto, não há necessidade de transferência de DNA. Portanto, o processo não é trabalhoso. |
Resumo - Vetores YAC vs BAC
O YAC se tornou uma ferramenta de pesquisa essencial em processos de clonagem devido à sua capacidade de clonar grandes fragmentos de DNA no organismo hospedeiro. No entanto, os YACs têm várias desvantagens como vetores, tais como dificuldades de construção, quimerismo, instabilidade, etc. Portanto, para superar esses problemas, os cientistas desenvolveram vetores BAC. O BAC foi construído usando regiões específicas do cromossomo de E. coli. É um vetor estável e pode ser facilmente construído. No entanto, o comprimento do DNA que o BAC pode manipular é até 20 vezes menor do que o do YAC. Esta é a diferença entre os sistemas vetoriais YAC e BAC. Hoje em dia, o BAC é mais preferido do que o YAC nos laboratórios.
