Diferença chave - Taq polimerase vs DNA polimerase
A DNA polimerase é uma enzima que cria um novo DNA a partir de seus blocos de construção (nucleotídeos). Em procariotos e eucariotos, diferentes tipos de DNA polimerases são encontrados. A duplicação do DNA é viável devido à presença dessas enzimas especiais, e a informação genética é passada para a prole pela ação das DNA polimerases. A Taq polimerase é um tipo especial de DNA polimerase termoestável e amplamente utilizado em PCR. A polimerase Taq é encontrada em bactérias termofílicas e purificada na replicação de DNA in vitro. A principal diferença entre a Taq polimerase e a DNA polimerase é que a Taq polimerase pode suportar altas temperaturas sem desnaturar, enquanto outras DNA polimerases se desnaturam em altas temperaturas (em temperaturas de degradação de proteínas).
CONTEÚDO
1. Visão geral e diferença principal
2. O que é Taq polimerase
3. O que é DNA polimerase
4. Comparação lado a lado - Taq polimerase vs DNA polimerase
5. Resumo
O que é Taq Polymerase?
A Taq polimerase (Taq DNA polimerase) é uma enzima usada para sintetizar DNA in vitro pela técnica de PCR. É produzido pela bactéria termofílica chamada Thermus aquaticus, que vive em fontes termais e fontes termais. A polimerase Taq é uma enzima termoestável que não se degrada em altas temperaturas. A polimerase Taq foi purificada pela primeira vez e publicada em Chien et al. em 1976. A técnica de PCR é realizada com auxílio da polimerase Taq devido à sua capacidade de tolerar altas temperaturas e oscilações de temperatura durante a PCR. A Taq polimerase catalisa a síntese de DNA quando há primers, nucleotídeos e o DNA molde de fita simples. A enzima consiste em um único polipeptídeo com peso molecular de aproximadamente 94 kDa. A polimerase Taq mostra sua atividade ótima a 80 ° C e na faixa de pH 7 - 8 com a presença de íons magnésio. Possui atividade tanto de polimerase quanto de exonuclease. A enzima é composta por uma única cadeia polipeptídica e o gene da Taq polimerase contém alto teor de G e C (67,9%).
A Taq polimerase termoestável permite a realização de PCR em altas temperaturas, o que aumenta a especificidade dos primers e reduz a produção de produtos de PCR indesejados (primer dímeros). A polimerase Taq também elimina a necessidade de adicionar novas enzimas à reação de PCR após cada ciclo de reação de PCR devido à sua capacidade de suportar altas temperaturas. A descoberta da Taq polimerase permitiu que o PCR funcionasse em um único tubo fechado em uma máquina relativamente simples. Devido a essas propriedades da Taq polimerase, a PCR torna-se uma técnica laboratorial popular realizada rotineiramente em muitas análises de biologia molecular relativas à análise de DNA.
A Taq polimerase é amplamente utilizada em técnicas de biologia molecular e existe uma necessidade de produção de Taq polimerase em grande escala. Portanto, usando a tecnologia de DNA recombinante e clonagem de genes, o gene que codificava a Taq DNA polimerase foi clonado e expresso em Escherichia coli. Isso facilitou muito a produção da Taq polimerase recombinante e reduziu o preço dessa enzima para uso adequado.
Figura 1: Taq Polimerase
O que é DNA polimerase?
A DNA polimerase é uma enzima que catalisa a síntese de DNA a partir de nucleotídeos. É a enzima mais precisa responsável por duplicar genomas e passar informações genéticas para a prole. Durante a divisão celular, a DNA polimerase duplica todo o seu DNA e passa uma cópia para cada célula filha. Em 1955, Arthur Kornberg descobriu a DNA polimerase em E. Coli. A função da DNA polimerase depende de vários requisitos; DNA molde, íons Mg +2, todos os quatro tipos de desoxinucleotídeos (dATP, dTTP, dCTP ed GTP) e uma sequência curta de RNA (primer). A síntese do DNA é feita na direção de 5 'para 3' pela DNA polimerase.
As DNA polimerases podem ser agrupadas em sete famílias diferentes: A, B, C, D, X, Y e RT (transcriptase reversa). Retrovírus codificam para RT; uma polimerase de DNA incomum que precisa de um modelo de RNA para a síntese de DNA. Existem cinco tipos diferentes de DNA polimerases encontrados em procariotos para diferentes funções na replicação do DNA. A DNA polimerase 3 é responsável pela polimerização da nova fita de DNA. A DNA polimerase 1 é responsável por reparar e remendar o DNA. As DNA polimerases 2, 4 e 5 são responsáveis pelo reparo e revisão do DNA. Em eucariotos, existem 15 tipos distintos de DNA polimerases. Eles incluem cinco famílias principais.
Figura 2: DNA polimerase
As DNA polimerases são usadas na clonagem de genes, PCR, sequenciamento de DNA, detecção de SNP, diagnóstico molecular, etc. A Taq polimerase é um tipo de DNA polimerase que pode tolerar altas temperaturas e estar disponível para síntese de DNA sem degradação.
Qual é a diferença entre Taq Polymerase e DNA Polymerase?
Artigo Diff meio antes da tabela
Taq Polimerase vs DNA Polimerase |
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| A Taq DNA polimerase é uma enzima que cria DNA. É uma enzima termoestável encontrada em termófilos | A DNA polimerase é uma enzima que facilita a replicação do DNA e é encontrada em organismos procarióticos e eucarióticos. |
| Degradação em altas temperaturas | |
| A polimerase Taq é ativa em altas temperaturas. | As DNA polimerases degradam em altas temperaturas desnaturantes de proteínas. |
| Usar | |
| Isso é amplamente usado em PCR | A Taq polimerase substituiu a DNA polimerase de coli originalmente usada em PCR. |
Resumo - Taq Polimerase vs DNA Polimerase
As DNA polimerases são as enzimas que sintetizam o DNA a partir de desoxinucleotídeos (blocos de construção do DNA) quando o modelo e os primers estão disponíveis. As DNA polimerases são necessárias para duplicar o DNA das células e passar para células-filhas idênticas durante a divisão celular. As polimerases de DNA adicionam novos nucleotídeos à extremidade 3 'do primer e alongam a síntese da nova fita de DNA na direção 5' para 3 '. A Taq DNA polimerase é uma das enzimas da DNA polimerase que é altamente útil no método de reação em cadeia da polimerase (PCR) de amplificação de DNA. A DNA polimerase 1 de E. coli foi usada anteriormente para PCR, mas a Taq polimerase comercial suplantou-a devido à sua alta especificidade de ligação do iniciador a temperaturas elevadas e produção de um rendimento mais alto do produto desejado com menos produto de amplificação não específico. Esta é a diferença entre a Taq Polimerase e a DNA Polimerase.
