Diferença chave - HPLC vs LCMS
Vejamos primeiro o significado de HPLC e LCMS antes de analisar a diferença entre HPLC e LCMS. A cromatografia é uma técnica de separação em análise química em que os constituintes da amostra são separados durante a passagem por um meio cromatográfico. Também envolve interação com a amostra, fase estacionária e fase móvel. HPLC significa Cromatografia Líquida de Alto Desempenho e é usado como um método de cromatografia líquida em química analítica. A combinação de Cromatografia Líquida e Espectroscopia de Massa (LCMS) foi desenvolvida para a análise quantitativa de biomoléculas selecionadas e é um procedimento de ensaio altamente sensível, preciso e específico em comparação com HPLC. Esta é a principal diferença entre HPLC e LCMC. Este artigo apresentará a HPLC e LCMC que lidam com análises químicas e discutirá as diferenças entre HPLC e LCMS.
O que é HPLC?
A cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC) é uma técnica de separação popular em química analítica. É usado principalmente para separar os componentes, para identificar e quantificar cada componente de uma mistura. Anteriormente, este método era conhecido como cromatografia líquida de alta pressão porque dependia de bombas para fazer fluir um solvente líquido pressurizado compreendendo a mistura da amostra através de uma coluna cheia com um material adsorvente sólido. Cada um dos constituintes da mistura da amostra interage de maneira diferente com o material adsorvente sólido, o que resulta em diferentes taxas de fluxo para diferentes constituintes. Isso pode levar à separação dos constituintes à medida que fluem para fora da coluna de HPLC.
HPLC tem sido usado para várias aplicações, como análise dos níveis de vitamina D no sangue, uso de drogas ilegais por atletas, detectando os resíduos de drogas em sua urina, separando os constituintes de uma amostra biológica complexa para fins de pesquisa e análise e fabricação de produtos farmacêuticos.
O que é LCMS?
Cromatografia líquida - espectrometria de massa (LCMS) é uma técnica analítica que combina as habilidades de separação física da cromatografia líquida com as habilidades de análise de massa da espectrometria de massa (MS). A cromatografia líquida é uma técnica de separação e a espectrometria de massa é usada para analisar a relação massa-carga das partículas carregadas. A separação física é geralmente realizada por HPLC e, alternativamente, LCMS também conhecido como HPLC-MS. LCMS é uma técnica analítica dominante que possui uma precisão, sensibilidade e especificidade muito altas em comparação com HPLC. Assim, é útil em muitas aplicações, como fins de pesquisa, análise de drogas, análise de alimentos, etc. LCMS é usado principalmente para separar, detectar, identificar e quantificar propriedades bioquímicas de uma amostra particular na presença de misturas químicas complexas.
Qual é a diferença entre HPLC e LCMC?
Sigla e definição de HPLC e LCMC
HPLC: HPLC significa Cromatografia Líquida de Alto Desempenho. É uma técnica de separação utilizada principalmente para separar os componentes, para identificar e quantificar cada componente de uma mistura.
LCMS: LCMS significa cromatografia líquida e espectrometria de massa. É uma técnica analítica que combina as habilidades de separação física da cromatografia líquida com as habilidades de análise de massa da espectrometria de massa (MS).
Características de HPLC e LCMC
Classificação
HPLC: Este é um método de cromatografia líquida apenas.
LCMS: Esta é uma combinação de método de cromatografia líquida e método de espectrometria de massa.
Eficiência
HPLC: Em comparação com LCMS, a análise de HPLC é menos eficiente e mais lenta.
LCMS: em comparação com HPLC, a análise de LCMS é eficiente e rápida.
Sensibilidade
HPLC: Em comparação com LCMS, a análise de HPLC é menos sensível.
LCMS: em comparação com HPLC, a análise de LCMS é mais sensível.
Especificidade
HPLC: Em comparação com LCMS, a análise de HPLC é menos específica.
LCMS: em comparação com HPLC, a análise de LCMS é mais específica.
Precisão
HPLC: HPLC fornece resultados menos precisos do que LCMS para determinação de alguns produtos químicos.
LCMS: LCMS fornece resultados mais precisos do que HPLC para determinação de alguns produtos químicos.
Componente
HPLC: HPLC pode ser considerado como um componente de LCMS.
LCMS: LCMS não pode ser considerado um componente de HPLC.
Fonte de íons
HPLC: A fonte de íons não existe no instrumento HPLC.
LCMS: a fonte de íons está presente no instrumento LCMS.
Formulários
HPLC: íons, polímeros, moléculas orgânicas e biomoléculas podem ser analisados usando HPLC.
LCMS: moléculas orgânicas e biomoléculas podem ser analisadas. Contrastando com o HPLC, o LCMS pode ser usado para examinar misturas resolvidas de forma incompleta.
Operação
HPLC: O diagrama de um instrumento HPLC é dado na figura 1 e geralmente inclui um amostrador automático, bombas e um detector. O amostrador introduz a mistura da amostra na fase móvel (mistura pressurizada de solventes como água, acetonitrila e / ou metanol) que a transfere para a coluna. As bombas fornecem o fluxo desejado e a composição da fase móvel através da coluna. A coluna é preenchida com o adsorvente, que é uma partícula sólida granulada, como sílica ou polímeros. O detector produz um sinal proporcional à quantidade de presença do constituinte da amostra na coluna, permitindo, portanto, uma análise quantificável dos constituintes selecionados da amostra. O instrumento HPLC é controlado e a análise de dados é fornecida por um microprocessador digital e software do usuário.
Figura 1: Diagrama do instrumento HPLC
LCMS: O diagrama do instrumento LCMS é dado na figura 2. O extrato da amostra é inserido na coluna que consiste em HPLC. Esta coluna retém os metabólitos da amostra com base em caracteres físicos, e diferentes metabólitos fluem para o espectrômetro de massa em diferentes intervalos de tempo. A espectroscopia de massa é usada para avaliar massas de partículas, para determinar o arranjo elementar de uma molécula e para esclarecer as estruturas da molécula. No entanto, a amostra deve ser ionizada para gerar moléculas carregadas, a fim de determinar suas relações massa-carga. Portanto, em vez de instrumentos de HPLC, o LCMS consiste em três módulos adicionais, como fonte de ferro, um analisador de massa e um detector. Uma fonte de íons pode transformar a amostra da fase gasosa em íons e um analisador de massa agrupando os íons por suas massas usando campos eletromagnéticos. Finalmente,um detector quantifica os valores e fornece dados de cada íon presente na amostra. A técnica LCMS pode ser usada para aplicações qualitativas e quantitativas.
Figura 2: Diagrama do instrumento LCMS
Em conclusão, HPLC é um método de cromatografia líquida, enquanto LCMS é uma combinação de cromatografia líquida e espectrometria de massa. Ambas as técnicas de análise têm características diferentes, mas podem ser usadas para identificar e quantificar composições de alimentos, produtos farmacêuticos e outras moléculas bioativas.
