Diferença chave - HPLC vs HPTLC
A principal diferença entre HPLC e HPTLC é que HPLC permite a separação quantitativa de componentes em uma amostra, enquanto HPTLC não permite a separação quantitativa de componentes em uma amostra.
A cromatografia é um método de separação física usado para separar e identificar os componentes de uma mistura. Tanto HPLC como HPTLC são técnicas cromatográficas. HPLC é cromatografia líquida de alto desempenho. HPTLC é cromatografia em camada fina de alto desempenho.
CONTEÚDO
1. Visão geral e diferença principal
2. O que é HPLC
3. O que é HPTLC
4. Comparação lado a lado - HPLC vs HPTLC em forma tabular
5. Resumo
O que é HPLC?
HPLC é cromatografia líquida de alto desempenho. É uma técnica analítica usada para separar, identificar e quantificar os componentes de uma mistura. Nesta técnica, a amostra é dissolvida em um solvente adequado. Em seguida, o solvente com a amostra é passado por uma bomba com uma determinada pressão. A bomba é preenchida com material adsorvente sólido. Então, alguns componentes se ligam fortemente ao material absorvente enquanto outros componentes se ligam fracamente. Isso faz com que os componentes tenham taxas de fluxo diferentes através da bomba. Portanto, os componentes podem ser separados facilmente.
Figura 01: Um sistema HPLC
O material adsorvente que preenche a bomba é conhecido como fase estacionária. O solvente com a amostra dissolvida é conhecido como fase móvel. A bomba usada nesta técnica é chamada de coluna. A coluna é preenchida com um material adsorvente, mais comumente, partículas de sílica. O tamanho dessas partículas pode variar de 2-50 μm. O processo de separação é afetado pela composição da fase móvel e pela temperatura do sistema. As interações entre a fase estacionária e o componente na amostra podem ser interações hidrofóbicas, interações dipolo-dipolo, ligações iônicas, etc.
A pressão de operação do HPLC é consideravelmente mais alta do que a da cromatografia líquida tradicional. Situa-se em torno de 50-350 bar. A diferença entre a cromatografia líquida e a HPLC é que na cromatografia líquida a amostra cai pela coluna por gravidade enquanto, na HPLC, a amostra é pressurizada pela coluna. O tamanho da coluna e das partículas absorventes também são muito pequenos quando comparados à tradicional cromatografia líquida. No entanto, a resolução dada pela técnica HPLC é superior.
O que é HPTLC?
HPTLC é cromatografia em camada fina de alto desempenho. É a forma avançada e automatizada do TLC tradicional. Essa técnica fornece uma resolução eficiente em um curto período de tempo. Neste método de análise, a amostra e uma referência podem ser analisadas ao mesmo tempo, o que permite que a amostra seja comparada com a referência. Ele oferece uma precisão analítica aprimorada do que outras técnicas cromatográficas. O tempo gasto para a análise é menor. A técnica é uma técnica de baixo custo.
Figura 02: Uma análise de corantes alimentares usando HPTLC
O método HPTLC é um processo simples, e a etapa de preparação da amostra também é eliminada (Na TLC tradicional, a etapa de preparação da amostra é incluída antes da separação. Esta etapa envolve limpeza e enriquecimento). O solvente pode ser usado diretamente sem qualquer pré-tratamento, embora outras técnicas cromatográficas exijam pré-tratamentos, como desgaseificação, filtração, etc.
O material adsorvente usado em HPTLC é sílica com tamanhos de partícula muito pequenos. Em TLC tradicional, o tamanho de partícula de sílica é de 5-20 μm, enquanto em HPTLC, é de 4-8 μm. A amostra é aplicada à placa HPTLC usando um aplicador. Proporciona uma aplicação uniforme e segura. Em seguida, as placas são colocadas em uma câmara que possui a fase móvel. A câmara deve estar saturada com o vapor da fase móvel. Após o processo de HPTLC, os pontos que se moveram podem ser detectados. Ao detectar as manchas na placa, a técnica HPTLC usa uma região de UV adequada ou uma câmara de iodo.
Qual é a diferença entre HPLC e HPTLC?
Artigo Diff meio antes da tabela
HPLC vs HPTLC |
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| HPLC é cromatografia líquida de alto desempenho. | HPTLC é cromatografia em camada fina de alto desempenho. |
| Técnica | |
| Em HPLC, a fase móvel com o solvente é passada por uma coluna preenchida com a fase estacionária. | No HPTLC, a amostra é colocada em uma placa de TLC e colocada dentro de uma câmara contendo a fase móvel; então, a amostra pode migrar para cima na placa junto com a fase móvel. |
| Medição | |
| Em HPLC, as diferenças entre as taxas de fluxo de componentes através da coluna são usadas para separar os componentes na amostra. | No HPTLC, as diferenças entre as distâncias percorridas por cada componente da amostra são usadas para separar os componentes da amostra. |
| Separação Quantitativa | |
| HPLC permite a separação quantitativa de componentes em uma amostra. | HPTLC não permite a separação quantitativa de componentes em uma amostra. |
Resumo - HPLC vs HPTLC
HPLC e HPTLC são duas técnicas cromatográficas. A principal diferença entre HPLC e HPTLC é que HPLC permite a separação quantitativa de componentes em uma amostra, enquanto HPTLC não permite a separação quantitativa de componentes em uma amostra.
