Diferença chave - transfecção transitória vs estável
A transfecção é um processo que está envolvido na transferência de genes de células eucarióticas usando métodos químicos ou físicos. A transfecção pode ser classificada em dois tipos principais denominados transfecção transitória e transfecção estável. Durante a transfecção transitória, o gene de interesse falha em se integrar com o genoma do hospedeiro e é expresso temporariamente dentro do hospedeiro por um curto prazo, enquanto que, na transfecção estável, o gene de interesse se integra com o genoma do hospedeiro e é sustentado por um longo prazo em várias gerações. Esta é a principal diferença entre transfecção transitória e estável. Em ambos os casos, a transfecção é bem-sucedida e os genes são expressos.
CONTEÚDO
1. Visão geral e diferença chave
2. O que é transfecção transitória
3. O que é transfecção estável
4. Comparação lado a lado - transfecção transitória vs estável
5. Resumo
O que é transfecção transitória?
A transfecção é uma ferramenta importante para inserir genes em células eucarióticas. Entre os dois tipos de transfecção, a transfecção transitória é uma forma comum de transferência de genes. Por meio de um vetor, genes estranhos são transformados dentro das células hospedeiras. Depois que o DNA estranho entra na célula hospedeira, há duas opções. Ele pode se integrar ao genoma do hospedeiro e se replicar ou ficar dentro dele sem se integrar ao genoma. A transfecção transitória exibe a expressão temporária dos genes inseridos sem integração no genoma do hospedeiro. Os genes expressam e produzem a proteína codificada até que a célula se divida. No entanto, devido à incapacidade de integração, não pode se replicar e entrar nas gerações futuras. Este tipo de transfecção é bem-sucedido por um curto período de tempo. Durante a divisão celular ou devido a alguns outros fatores, o DNA estranho é sujeito à degradação. A transfecção transitória é mostrada quando o DNA estranho está na forma de DNA altamente enrolado.
Figura 01: Transfecção Transiente
O que é transfecção estável?
A transfecção estável mostra integração bem-sucedida de genes estranhos no genoma do hospedeiro. Uma vez que o DNA estranho entra na célula hospedeira, parte do DNA estranho se integra ao genoma do hospedeiro e se torna parte dele. Portanto, o DNA estranho também se replica e passa para as gerações futuras quando o genoma do hospedeiro se replica. Este tipo de transfecção é complexo e raro. No entanto, devido à transfecção estável para o genoma, essa característica é mantida por um período mais longo de várias gerações.
A transfecção estável é um processo difícil e requer uma entrega eficaz de DNA e aquisição de células do DNA estranho em seu genoma. Portanto, o DNA linear favorece a transfecção estável do que o DNA circular. No entanto, a taxa de transfecção estável é de cerca de um em cada 10 4 culas transformadas. A transfecção estável pode ser observada pela cotransfomação de um marcador selecionável e realizando a seleção artificial em um meio.
Figura 02: Transfecção estável
Qual é a diferença entre transfecção transitória e estável?
Artigo Diff meio antes da tabela
Transfecção Transiente vs Estável |
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| O DNA estranho não se integra ao genoma do hospedeiro. | O DNA estranho se integra ao genoma do hospedeiro e torna-se parte dele. |
| Replicação dentro do host | |
| Genes transfectados transitoriamente não se replicam no hospedeiro. Portanto, os genes não são passados para as próximas gerações. | Os genes são replicados dentro do hospedeiro e passados para as gerações futuras. |
| Duração da expressão gênica | |
| Os genes são expressos por um período de tempo finito e depois disso, são destruídos. | Os genes se tornam parte do genoma e se expressam dentro da geração por um longo período de tempo. |
| Usar | |
| Isso é útil para estudar os efeitos da expressão de curto prazo de genes ou produtos de genes. | Isso é útil para estudar os efeitos das expressões gênicas a longo prazo. |
| Detecção da Transfecção | |
| Os genes são expressos e podem ser facilmente detectados pela inserção de um gene repórter. | A transfecção estável pode ser facilmente detectada inserindo um marcador selecionável e selecionando por meio de seleção artificial na mídia. |
| Ocorrência e Processo | |
| A transfecção transitória é comum e não complexa de realizar. | A transfecção estável é rara em ocorrência e complexa de realizar. |
| Natureza do DNA | |
| DNA altamente superenrolado é adequado para transfecção transitória. | DNA linear é adequado para transfecção estável. |
| Formulários | |
| Isso é usado para estudos de knockdown ou silenciamento de genes com RNAs inibitórios, produção de proteínas em pequena escala | Isso é usado para a produção de proteínas em larga escala, estudos farmacológicos de longo prazo, terapia gênica, pesquisas sobre os mecanismos de regulação genética de longo prazo |
Resumo - Transfecção Transiente vs Estável
As transfecções transitórias e estáveis são dois tipos de transfecções mostradas durante a transferência de genes para células eucarióticas por sistemas não baseados em vírus. O DNA estranho transformado não é integrado ao genoma do hospedeiro na transfecção transitória, embora se integre ao genoma do hospedeiro na transfecção estável. O DNA espiralado circular é mostrado na transfecção transitória, enquanto o DNA linear prefere a transfecção estável. Esta é a diferença entre transfecção transitória e estável. No entanto, a transfecção transitória é mais comum e fácil em comparação com a transfecção estável. Mas a seleção de um entre dois depende do propósito da transferência gênica e da duração do projeto de pesquisa.
