Diferença chave - Eletroforese em gel vs Página SDS
A eletroforese em gel é uma técnica que separa macromoléculas em um campo elétrico. É um método comum em biologia molecular separar DNA, RNA e proteínas de misturas de acordo com seus tamanhos moleculares. SDS Page é um tipo de eletroforese em gel que é usado para separar proteínas de uma mistura de proteínas com base em seus tamanhos. Eletroforese em gel é um termo usado para se referir à técnica normal aplicada para DNA, RNA e separação de proteínas, enquanto a página SDS é um tipo de eletroforese em gel. Esta é a principal diferença entre a eletroforese em gel e a página SDS.
CONTEÚDO
1. Visão geral e diferença principal
2. O que é eletroforese em gel
3. O que é a página SDS
4. Comparação lado a lado - Eletroforese em gel vs Página SDS
5. Resumo
O que é eletroforese em gel?
A eletroforese em gel é uma técnica comum usada em laboratórios para separar moléculas carregadas como DNA, RNA, proteínas, etc. de suas misturas. Um gel é usado na eletroforese em gel. Ele atua como uma peneira molecular. Existem dois tipos de géis usados em eletroforese em gel: agarose e poliacrilamida. A seleção do gel e a preparação do gel são fatores importantes a serem considerados nas eletroforeses em gel, uma vez que o tamanho dos poros do gel deve ser cuidadosamente manipulado para uma boa separação das moléculas por meio da eletroforese em gel. A eletroforese em gel possui um campo elétrico conectado às duas extremidades do gel. Uma extremidade do gel mostra uma carga positiva, enquanto a outra extremidade está carregada negativamente.
DNA e RNA são moléculas carregadas negativamente. Uma vez carregados no gel a partir da extremidade negativa do gel e aplicados ao campo elétrico, eles migram através dos poros do gel em direção à extremidade carregada positivamente do gel. A velocidade da migração depende da carga e do tamanho da molécula. Moléculas menores migram facilmente através dos poros do gel do que moléculas maiores. Conseqüentemente, as moléculas menores percorrem uma longa distância através do gel e as moléculas maiores percorrem uma distância curta. Para observar a viagem das moléculas no gel, são usados tipos especiais de corantes. O campo elétrico é aplicado por um determinado período de tempo e interrompido para evitar a perda de moléculas e manter as moléculas em suas posições percorridas. Diferentes bandas podem ser observadas no gel. Essas bandas representam as moléculas de diferentes tamanhos. Conseqüentemente,a eletroforese em gel é útil para diferenciar moléculas de acordo com seus tamanhos.
A eletroforese em gel é incorporada em várias técnicas como uma técnica preparativa em biologia molecular, como PCR, RFLP, clonagem, sequenciamento de DNA, Southern blotting, mapeamento de genoma, etc.
Figura 01: Eletroforese em gel de agarose
O que é a página SDS?
A eletroforese em gel de dodecilsulfato de sódio poliacrilamida (SDS Page) é um tipo de eletroforese em gel usado para separar proteínas. Quando a eletroforese em gel é usada para separar proteínas, tratamentos especiais são necessários, uma vez que as proteínas não são carregadas negativamente como DNA e RNA e não migram para a extremidade positiva ou negativa. Portanto, as proteínas são desnaturadas e revestidas com uma carga negativa antes da eletroforese em gel. É feito com um detergente denominado dodecil sulfato de sódio (SDS). A eletroforese em gel que usa SDS e um gel de poliacrilamida como meio de suporte é conhecida como SDS Page. Esta técnica é comumente usada em bioquímica, genética, ciência forense e biologia molecular.
Durante a página SDS, as proteínas são misturadas com SDS. SDS desdobra proteínas em uma forma linear e as reveste com uma carga negativa proporcional à sua massa molecular. Devido à carga negativa, as moléculas de proteína migram em direção à extremidade de carga positiva do gel e se separam de acordo com suas massas moleculares. Na página SDS, a poliacrilamida é usada como suporte sólido para o gel. A separação real das proteínas depende principalmente das propriedades do gel. Portanto, a preparação do gel de poliacrilamida deve ser feita com cuidado e as concentrações corretas de poliacrilamida devem ser usadas. Os géis de poliacrilamida apresentam alta resolução do que os géis de agarose. Portanto, a página SDS é considerada uma técnica de alta resolução para separação de proteínas.
A página SDS é um tipo de eletroforese em gel desnaturante. Tem uma limitação importante na análise de proteínas. Uma vez que o SDS desnatura as proteínas antes da separação, ele não permite a detecção de atividade enzimática, interações de ligação de proteínas, cofatores de proteínas, etc.
Figura 02: página SDS
Qual é a diferença entre Eletroforese em Gel e Página SDS?
Eletroforese em Gel vs Página SDS |
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| A eletroforese em gel é um método realizado para separar macromoléculas usando um campo elétrico. | SDS Page é uma técnica de eletroforese em gel de alta resolução usada para separar proteínas com base em sua massa. |
| Gel Run | |
| Pode ser executado de forma horizontal ou vertical. | A página SDS sempre é executada verticalmente. |
| Base para Separação | |
| A separação ocorre de acordo com a carga e o tamanho. | A separação das proteínas ocorre de acordo com a massa e carga. |
| Resolução | |
| Eletroforese em gel de agarose tem baixa resolução e eletroforese em gel de poliacrilamida tem resolução mais alta | A página SDS tem uma resolução melhor. |
| Desnaturação | |
| A eletroforese em gel inclui técnicas desnaturantes e não desnaturantes. | A página SDS desnatura as proteínas antes da separação. |
Resumo - Eletroforese em Gel vs Página SDS
A eletroforese em gel é uma técnica comum usada para separação e análise de DNA, RNA e proteínas com base em seu tamanho e carga. Existem dois tipos principais de eletroforese em gel, nomeadamente eletroforese em gel de agarose e eletroforese em gel de poliacrilamida. Os géis de agarose são usados principalmente para separação de ácidos nucléicos; quando uma resolução mais alta é necessária, géis de poliacrilamida são usados. A página SDS é um tipo de eletroforese em gel comumente usado para separar misturas complexas de proteínas. É considerada uma técnica de separação de proteínas de alta resolução. Esta é a diferença entre a eletroforese em gel e a página SDS.
