Diferença chave - RNASE A vs RNASE H
As ribonucleases são nucleases que degradam especificamente o RNA em unidades menores. Eles podem ser divididos em duas categorias; endoribonucleases e exoribonucleases. A endoribonuclease é uma endonuclease que pode degradar o RNA de fita simples ou dupla. Ele cliva as ligações fosfodiéster dentro de uma cadeia polinucleotídica de RNA. Os exemplos são RNase A, RNase III, RNase T1, RNase P e RNase H. A exoribonuclease é uma exonuclease que degradou o RNA removendo os nucleotídeos terminais da extremidade 5 'ou 3' da molécula de RNA. Os exemplos são RNase R, RNase II, RNase D e RNase PH. A principal diferença entre RNASE A e RNASE H é que a RNase A é uma ribonuclease pancreática que degrada especificamente o RNA de fita simples em componentes menores, enquanto a RNase H é uma enzima não específica que cliva o RNA em híbrido de RNA-DNA em unidades menores via o mecanismo hidrolítico.
CONTEÚDO
1. Visão geral e diferença principal
2. O que é RNASE A
3. O que é RNASE H
4. Semelhanças entre RNASE A e RNASE H
5. Comparação lado a lado - RNASE A vs RNASE H na forma tabular
6. Resumo
O que é RNASE A?
A RNase A é uma ribonuclease pancreática que cliva especificamente os resíduos de citosina e uracila desemparelhados na extremidade 3 'do RNA de fita simples. RNase H funciona em uma concentração de sal mais elevada (0,3 M ou concentração de NaCl superior). A reação hidrolítica consiste em duas etapas. Forma um produto fosforilado 3 'por meio do intermediário monofosfato cíclico 2', 3 '. Embora seja específico para RNA de fita simples em concentração de sal mais alta, ele também pode degradar RNA de fita dupla e RNA em híbridos de RNA-DNA em concentração de NaCl mais baixa (menor que NaCl 0,3M).
Bruce Merrifield foi o primeiro a sintetizar essa enzima. RNase A é uma enzima muito popular na pesquisa molecular. RNase A pancreática bovina é um exemplo de RNase A. E é uma das enzimas mais resistentes que são usadas em laboratório. Esta enzima não precisa de cofator para sua atividade. É uma enzima altamente termoestável. RNase A é a primeira enzima e a terceira proteína para a qual uma sequência de aminoácidos correta foi detectada. Esta enzima é muito pequena, com 124 aminoácidos e massa molecular de 12600da. E tem quatro resíduos de histidina (His 12 e His 119 que envolvem a reação catalítica).
Figura 01: O RNase A
A RNase A pode ser isolada fervendo uma amostra bruta. Quando ferve, todas as outras enzimas degradam a RNase A. A RNase A é uma enzima surpreendentemente estável. Esta enzima inibe com a proteína inibidora da ribonuclease, complexos de metais pesados e vanadato de uridina.
O que é RNase H?
A RNase H é uma enzima ribonuclease inespecífica que pode degradar o RNA no híbrido RNA-DNA por meio de reação hidrolítica. A RNase H cliva a ligação 3'- a OP do RNA em um híbrido RNA-DNA. Em última análise, ele produz produtos com terminação de fosfato 3'OH e 5 '. Na replicação do DNA, ele desempenha um papel fundamental ao remover o primer de RNA após a formação de novas fitas de DNA. Em condições de laboratório, degrada especificamente o RNA no híbrido de RNA-DNA, mas não no DNA e no RNA não hibridizado. E esta enzima é geralmente usada para destruir o molde de RNA após a primeira fita complementar de DNA ser formada durante a síntese de cDNA.
Figura 02: RNase H
RNase H também usa em ensaios de proteção de nuclease. Também pode ser incorporado na remoção da cauda poli A do mRNA. RNase H tem a capacidade de destruir o RNA não codificador dentro e fora da célula. Os íons metálicos são necessários como cofatores para a atividade desta proteína. Um quelante (EDTA) pode ser usado para inibir a enzima RNase H.
Quais são as semelhanças entre RNASE A e RNASE H?
- Ambos são proteínas por natureza.
- Ambos são endoribonuclease
- Ambos podem degradar o RNA.
- Ambos realizam reações hidrolíticas.
- Os laboratórios moleculares usam ambos.
Qual é a diferença entre RNASE A e RNASE H?
Artigo Diff meio antes da tabela
RNASE A vs RNASE H |
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| A RNase A é uma ribonuclease pancreática que cliva especificamente a extremidade 3 'da citosina não pareada e os resíduos de uracila do RNA de fita simples em concentrações mais altas de sal. | A RNase H é uma enzima ribonuclease inespecífica que pode degradar o RNA no híbrido RNA-DNA por meio de reação hidrolítica. |
| Natureza da clivagem de RNA | |
| A RNase A cliva especificamente o RNA de fita simples em concentrações de sal mais altas. | RNase H cliva RNA em híbrido de RNA-DNA. |
| Necessidade de Co-fatores para Atividade | |
| A RNase A não precisa de cofatores para sua atividade. | A RNase H precisa de íons metálicos como cofatores para sua atividade. |
| Inibidores da atividade proteica | |
| A proteína inibidora da ribonuclease, os complexos de metais pesados e vanadato de uridina inibem a atividade da RNAse A. | Um quelante (EDTA) inibe a atividade de RNase H. |
| Remoção de primer de RNA na replicação de DNA | |
| RNase A não é usado para remoção de primer de RNA na replicação de DNA. | RNase H é usado para remoção de primer de RNA na replicação de DNA |
| Remoção de modelo de DNA na síntese de DNA complementar (C-DNA) | |
| A RNase A não é usada para a remoção do molde de RNA durante a síntese de DNA complementar (C-DNA). | A RNase H é usada para a remoção do molde de RNA durante a síntese de DNA complementar (C-DNA). |
| Remoção de Poly-A-Tail em mRNA Hybridized to Oligo (dt) | |
| A RNase A não é usada para remover a "cauda poli-A" em mRNA hibridizado com oligo (dt). | RNase H é usado para remover "cauda poli-A" em mRNA hibridizado com oligo (dt) |
Resumo - RNASE A vs RNASE H
As ribonucleases são enzimas nuclease que têm a capacidade de clivar o RNA em unidades menores. Eles são dois tipos; endoribonucleases e exoribonucleases. A endoribonuclease é uma endonuclease que tem a capacidade de degradar o RNA de fita simples ou dupla. E cliva a ligação fosfodiéster dentro de uma cadeia polinucleotídica de RNA. RNase A e RNase H são duas endoribonucleases. A RNase A é uma ribonuclease pancreática que cliva especificamente resíduos de citosina e uracila não pareados na extremidade 3 'do RNA de fita simples em concentração de sal mais alta. A RNase H é uma enzima ribonuclease inespecífica que pode degradar o RNA no híbrido RNA-DNA por meio de reação hidrolítica. Esta é a diferença entre RNase A e RNase H.
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