Diferença Entre ELISA Direto E Indireto

2024 Autor: Mildred Bawerman | [email protected]. Última modificação: 2023-12-16 08:41

Diferença chave - ELISA direto vs indireto

Um imunoensaio enzimático (ELISA), também conhecido como imunoensaio enzimático, é um teste sorológico que detecta anticorpos no sangue. É usado como uma ferramenta de diagnóstico para descobrir se o paciente foi exposto a um determinado tipo de vírus ou outro agente infeccioso (antígeno) e se o corpo produziu anticorpos contra a infecção. O ELISA também pode identificar infecções passadas e atuais. Portanto, o ELISA é frequentemente usado como um teste de pré-seleção pelos médicos antes de uma análise aprofundada das doenças. Este teste pode ser realizado em laboratório, retirando uma amostra de sangue do paciente. Existem dois tipos de teste ELISA: ELISA direto e ELISA indireto. A principal diferença entre o ELISA direto e o indireto é que o ELISA indireto é mais sensível e requer a adição de um anticorpo secundário, enquanto o ELISA direto é menos sensível e usa apenas um anticorpo primário.

CONTEÚDO

1. Visão geral e diferença fundamental

2. O que é ELISA direto

3. O que é ELISA indireto

4. Comparação lado a lado - ELISA direto vs indireto

5. Resumo

O que é Direct ELISA?

ELISA é um teste de diagnóstico de doença realizado para identificar a presença de antígenos ou anticorpos específicos no sangue. É feito como um ensaio em placa. Ele usa anticorpos ligados a enzimas facilmente testadas. A presença de antígenos na amostra de soro liga-se a anticorpos específicos ligados a enzimas. Na etapa final, um substrato específico é adicionado para reagir com a enzima. A enzima converte o substrato em um produto colorido ou produtor de sinal. A mudança de cor no substrato químico revela a presença de um determinado anticorpo na amostra de soro. O teste ELISA direto usa apenas um anticorpo primário ligado à enzima. Ao se ligar ao antígeno, muda rapidamente de cor, indicando a presença do agente infeccioso no sangue. Contudo,a intensidade dos sinais é mais fraca no ELISA direto, uma vez que os epítopos são limitados à ligação dos antígenos. Portanto, o ELISA direto é menos sensível em comparação com o ELISA indireto.

Figura 01: Teste ELISA direto

O que é ELISA indireto?

O ELISA pode ser realizado usando dois tipos de anticorpos, nomeadamente; anticorpo primário e anticorpo secundário. A ferramenta ELISA indireta usa os dois tipos de anticorpos para amplificar os sinais para melhor detecção. A técnica ELISA indireta é realizada da seguinte forma.

1. As placas são incubadas com antígenos e lavadas para bloquear a ligação não específica.
2. Em seguida, os anticorpos primários são adicionados e lavados.
3. O anticorpo secundário ligado à enzima é adicionado e lavado.
4. Um substrato é adicionado e deixado reagir com enzimas.
5. Os sinais são detectados e a presença ou ausência do antígeno específico na amostra é identificada.

No teste ELISA indireto, vários anticorpos secundários podem se ligar a um único anticorpo primário. Os anticorpos secundários estão ligados a enzimas facilmente testadas. Portanto, uma ligação pode fazer um sinal forte devido a mais de uma interação. Portanto, o ELISA indireto é mais sensível do que o ELISA direto. No entanto, o ELISA indireto pode produzir sinais inespecíficos devido a reações cruzadas dos anticorpos secundários.

Figura 02: Teste ELISA indireto

Qual é a diferença entre ELISA direto e indireto?

Artigo Diff meio antes da tabela

ELISA direto vs indireto
O ELISA direto é menos sensível em comparação com o ELISA indireto.	O ELISA indireto é mais sensível.
Tempo necessário
O teste ELISA direto é um processo rápido.	O ELISA indireto é demorado.
Uso de anticorpos
Apenas um tipo de anticorpos (anticorpos primários) é usado no ELISA direto.	Os anticorpos primários e secundários são usados para ELISA indireto.
Link com Enzimas
Os anticorpos primários estão ligados a enzimas.	Os anticorpos secundários estão ligados a enzimas.
Reatividade cruzada de segundos anticorpos
O ELISA direto elimina a reatividade cruzada de segundos anticorpos.	O ELISA indireto é afetado pela reatividade cruzada dos segundos anticorpos.
Sinais
Os sinais são fracos em comparação com ELISA indireto.	Os sinais são amplificados no ELISA indireto. Portanto, é fácil de detectar.

Resumo - ELISA direto vs indireto

ELISA é uma técnica bioquímica usada principalmente em imunologia para detectar a presença de um anticorpo ou antígeno em uma amostra de sangue de um paciente. Pode ser realizado por meio de dois processos conhecidos como ELISA direto ou indireto. O teste ELISA direto usa apenas anticorpos primários para detectar o antígeno, enquanto o ELISA indireto usa anticorpos primários e secundários. No ELISA direto, os anticorpos primários são marcados, enquanto no ELISA indireto os anticorpos secundários são marcados. Esta é a diferença entre ELISA direto e indireto.