Diferença Chave - Nitrocelulose vs Membrana de Nylon
O blotting é uma técnica importante para a detecção de sequências específicas de DNA, RNA e proteínas de suas misturas em biologia molecular. Isso é feito por meio de uma membrana chamada blot. Existem diferentes técnicas de blotting, como blotting norte, sul e oeste. A seleção de uma membrana adequada para o processo de transferência deve ser feita com cuidado para evitar ligações inespecíficas e detecções erradas. Nitrocelulose, náilon e PVDF são membranas comumente usadas em técnicas de blotting. Eles têm características diferentes. A principal diferença entre nitrocelulose e membrana de náilon é que as membranas de nitrocelulose têm alto potencial de imobilização de proteínas, enquanto as membranas de náilon têm alto potencial de imobilização de ácido nucleico. No entanto, ambos os tipos de membranas são frequentemente usados em técnicas de transferência.
CONTEÚDO
1. Visão geral e principal diferença
2. O que é uma membrana de nitrocelulose
3. O que é uma membrana de náilon
4. Comparação lado a lado - nitrocelulose x membrana de náilon
5. Resumo
O que é uma membrana de nitrocelulose?
A membrana de nitrocelulose é um filtro de membrana comumente usado em técnicas de transferência de ácido nucléico e proteína. Tem um alto potencial de ligação às proteínas. Portanto, as membranas de nitrocelulose são amplamente utilizadas na técnica de western blotting. As membranas de nitrocelulose são compatíveis com todas as técnicas de hibridização e apresentam capacidades de ligação superiores sem interferências. As membranas de nitrocelulose são naturalmente hidrofílicas por natureza. Eles fazem interação hidrofílica com moléculas e as imobilizam de forma eficiente na membrana. As membranas de nitrocelulose comerciais estão disponíveis em dois tamanhos de poro: 0,45 e 0,2 µm.
Figura 01: Membrana de nitrocelulose usada em western blotting
O que é uma membrana de náilon?
A membrana de nylon é outro tipo de membrana comercial usada em técnicas de transferência. É usado alternativamente com membranas de nitrocelulose para manchas sul e norte. As membranas de nylon são ideais para o Southern blotting do que a nitrocelulose devido à sua alta afinidade de ligação com o DNA. Devido a várias características exclusivas das membranas de náilon, os pesquisadores costumam usar membranas de náilon para manchas sul e norte em vez de sobre a membrana de nitrocelulose. As membranas de nylon também são recomendadas para decapagem e reexame, ao contrário da nitrocelulose.
Figura 02: Membrana de nylon usada para Southern blotting
Qual é a diferença entre Nitrocelulose e Membrana de Nylon?
Artigo Diff meio antes da tabela
Nitrocelulose vs Membrana de Nylon |
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| As membranas de nitrocelulose são quebradiças. | As membranas de nylon são menos quebradiças. |
| Manipulação | |
| Eles são difíceis de manusear. | Eles são fáceis de manusear. |
| Reprovando | |
| Membranas de nitrocelulose sem suporte são difíceis de rebrotar. | Repetir é fácil com membranas de náilon. |
| Compatibilidade com várias condições de armazenamento | |
| As membranas de nitrocelulose têm menos resistência para suportar várias condições de armazenamento. | As membranas de nylon respondem de forma mais robusta a várias condições de armazenamento. |
| Usar | |
| Pré-umedecimento é necessário. | A pré-umidificação não é necessária para membranas de náilon. |
| Natureza Hidrofílica | |
| As membranas de nitrocelulose são hidrofílicas por natureza, mas são menos hidrofílicas do que as membranas de náilon. | Eles são altamente hidrofílicos por natureza. |
| Potencial de imobilização | |
| As membranas de nitrocelulose têm menos afinidade por ácidos nucléicos. Mas ele tem uma grande afinidade por proteínas. | As membranas de nylon têm um alto potencial de ligação com ácidos nucléicos do que as membranas de nitrocelulose. |
Resumo - Nitrocelulose vs Membrana de Nylon
Membranas de nitrocelulose e náilon são folhas especiais usadas na técnica de blotting para reproduzir o padrão de bandas no gel. Eles possibilitam detectar uma seqüência específica ou uma proteína das misturas, imobilizando-as na membrana. Uma vez que as moléculas estão imobilizadas na membrana, pode ser usado como substrato para análise de hibridização com sondas marcadas. A membrana de nitrocelulose é comumente usada para detecção de proteínas na técnica de western blotting devido à sua alta afinidade de ligação com proteínas. Membranas de náilon são freqüentemente usadas para manchas sul e norte. Esta é a diferença entre nitrocelulose e membrana de náilon.
